細胞名稱:KTC-1人甲狀腺癌細胞
貨號:WS60129(STR鑒定)
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞介紹
人甲狀腺乳頭狀癌細胞(papillary thyroid carcinoma, PTC)。該細胞株經(jīng)過STR鑒定,與國際上ATCC、DSMZ、JCRB和RIKEN 公布的STR數(shù)據(jù)庫中8000余種細胞均不相符,排除被常見細胞系污染的可能。由于KTC-1細胞本身沒有公布可比對的STR圖譜數(shù)據(jù),我們初步判斷該細胞可能為KTC-1。KTC-1的STR檢測結(jié)果為:
D5S818:11,12;D13S317:11,12;D7S820:11,11;D16S539:12,12;VWA:14,17;TH01:9,9;AM:X,Y;TPOX:11,11;CSF1PO:10,12。
一、細胞特性
1) 來源:男 甲狀腺癌
2) 形態(tài):上皮樣,貼壁生長
3) 含量:>1x10^6 細胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用。
二、運輸和保存
干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
三、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備
1) 準備RPMI-1640(推薦WS-P-0001)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%; GlutaMAX-1谷氨酰胺1%; MEM NEAA非必需氨基酸;Sodium Pyruvate丙酮酸鈉 %;雙抗,1%
血清我們推薦FBS500-WP-002
注:具體培養(yǎng)方式以隨貨說明書為準?。。?!
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
四、傳代方法
收到細胞后,在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,用力拍打瓶壁,期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,直至50-70%的細胞脫落后,加入2ml 以上完全培養(yǎng)基中止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加完全培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二。
注:
1、觀察細胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。
2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
4、收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們聯(lián)系。